細胞計數片是一塊特制的厚型載玻片，載玻片上有四個槽構成三個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽分隔成兩半，每個半邊上面各刻有一小方格網，每個方格網共分九個大格，中央的一大格作為計數用，稱為計數區。計數區的刻度有兩種：一種是計數區分為16個大方格（大方格用三線隔開），而每個大方格又分成25個小方格；另一種是一個計數區分成25個大方格（大方格之間用雙線分開），而每個大方格又分成16個小方格。但是不管計數區是哪一種構造，它們都有一個共同特點，即計數區都由400個小方格組成。
細胞計數片實驗原理：當待測細胞懸液中細胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細胞的數目，即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。
細胞計數片的具體操作：
1. 將計數板及蓋片擦拭干凈，并將蓋片蓋在計數板。
2. 將細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
3. 計算板四大格細胞總數，壓線細胞只計左側和上方的。然后按公式計算：細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104，說明：公式中除以4，因為計數了4個大格的細胞數。
公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為：1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）=0.1mm3而1ml=1000mm3（注意：鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算，若細胞團10%以上，說明分散不好，需重新制備細胞懸液）。
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